Аналіз геному Методи, Дейвіс К, 1990 рік, скачати книгу


Автор (и): Дейвіс К. Формат файлу: DJVU, 246 стор, 1990 р.
Опис:

Збірник молекулярно-біологічних методів, використовуваних при вивченні геному людини, написаний колективом авторів із США і Великобританії. Викладу кожного методу передує короткий теоретичне введення, що робить книгу доступною для початківців дослідників.
Описано методи трансфекції еукаріотичних клітин; рестрикційної картування; технологія великих молекул ДНК; виявлення одиничних замін нуклеотидів в ДНК; проведення полімеразної ланцюгової реакції одержання ДНК; генна дактилоскопія.
Для молекулярних біологів і генетиків.

Зміст:

Від редакції
Передмова
Список скорочень

Глава 1. Методи переносу генетичного матеріалу в клітини ссавців
1. Введення
2. Загальні положення
2.1. Необхідні умови
2.2. Селекція
3. Злиття цілих клітин
3.1. Введення
3.2. Отримання клітинних гібридів за допомогою злиття, індукованого ПЕГ (основна методика)
3.3. Можливі помилки і варіанти
4. Перенесення генів за допомогою міні-клітин (MMGT)
4.1. Введення
4.2. Метод MMGT
4.3. Очищення міні-клітин
4.4. Можливі помилки і варіанти методики
5. Перенесення генів, опосередкований хромосомами (CMGT)
5.1. Введення
5.2. Виділення хромосом
5.3. Перенесення хромосом
5.4. Попередня селекція
5.5. Можливі помилки і варіанти методики
6. Перенесення генів, опосередкований ДНК
6.1. Введення
6.2. Трансфекція ДНК з використанням фосфату кальцію
6.3. Спільний перенесення (котрансфекція) і попередня селекція
6.4. Можливі помилки і варіанти методики
7. Висновок
Література

Глава 2. Рестрикційної картування
1. Введення
2. Стратегія
2.1. Порівняння клонів
2.2. Вектори
2.3. Селекція клонів
3. Експериментальна частина
3.1. Створення бібліотеки
3.2. Аналіз клонів
3.3. Обробка результатів
3.4. Остаточне заповнення карти (закриття карти)
4. Висновок
4.1. Карта С. elegans
4.2. Картування інших організмів
5. Прописи розчинів
Література

Глава 3. Пульс-електрофорез і методи роботи з великими молекулами ДНК
1. Введення
2. Приготування зразків ДНК
2.1. Приготування вставок із зразками ДНК найпростіших
2.2. Виділення ДНК з культивованих клітин і лімфоцитів
2.3. Виділення ДНК з клітин прокаріотів
2.4. Виділення ДНК з клітин грибів
2.5. Виділення ДНК з рослинних клітин
3. Робота з агарозному блок-вставками, що містять зразки ДНК
3.1. Ферментативна обробка
4. Пульс-електрофорез (ПЕФ)
4.1. Заливка гелю і нанесення зразків
4.2. Підбір ефективних умов поділу
5. Фотографування, блотингу і гібридизація
5.1. Фотографування та блотингу
5.2. Гібридизація
6. Додаток
Література

Глава 4. Стрибки по хромосомі
1. Введення
2. Область застосування методу
3. Стандартні бібліотеки «стрибків»
3.1. Типи «стрибків»
3.2. Принцип створення стандартних бібліотек
3.3. Отримання ДНК-фрагментів бажаного розміру
3.4. Циклізація
3.5. Клонування та скринінг
3.6. Аналіз клонів
3.7. Послідовні «стрибки»
4. Специфічні бібліотеки «стрибків»
4.1. Принцип методу
4.2. Методика створення бібліотеки
5. Бібліотеки клонів-зв'язок
5.1. Принцип конструювання
5.2. Методика отримання Notl-бібліотеки Ілона-зв'язок
5.3. Використання ДНК з сортованих хромосом
6. Можливі вдосконалення
Література

Глава 5. Виявлення одиничних нуклеотидних замін в ДНК: розщеплення РНКази і денатурують градієнтний гель-електрофорез
1. Введення
2. Загальний Опис:методів
2.1. РНКазное розщеплення
2.2. Денатурують градієнтний гель-електрофорез
2.3. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)
3. Попередні процедури
4. Полімеразна ланцюгова реакція
4.1. Матеріали
4.2. Методи
5. Метод РНКазного розщеплення
5.1. Матеріали
5.2. Методи
6. Денатурують градієнтний гель-електрофорез
6.1. Гель-електрофоретична система
6.2. Підготовчі експерименти: перпендикулярно-градієнтний н оптимізуючий електрофорези
6.3. Приготування зондів для аналізу за допомогою ДГГЕ
6.4. Виявлення одиничних нуклеотидних замін за допомогою
денатуруючого градієнтного гель-електрофорезу
Література

Глава 6. Полімеразна ланцюгова реакція
1. Введення
2. Основні методики
2.1. Обладнання
2.2. Компоненти реакції
2.3. Параметри температурних циклів
3. Ампліфікація геномної послідовності «вручну»
4. Пряме секвенування ампліфікованих фрагментів ДНК
4.1. Секвенування дволанцюжкові зразків
4.2. Секвенування одноланцюгових фрагментів ДНК
5. Висновок
Література

Глава 7. Геномна дактилоскопія
1. Введення
2. Гібрідізаціонних зондів для геномної дактилоскопії
2.1. Зонди на основі мінісателітів
2.2. М13
3. Гель-електрофорез і перенесення ДНК
3.1. Вибір ферменту рестрикції
3.2. Приготування зразків ДНК для електрофорезу
3.3. Умови електрофорезу
3.4. Перенесення по Саузерн
4. Умови гібридизації та відмивання фільтрів
4.1. Мінісателіти
4.2. Метод геномної дактилоскопії з використанням М13
4.3. Радіоавтографія
4.4. Видалення проб з нейлонових фільтрів
5. Використання методу геномної дактилоскопії в аналізі генетичного зчеплення
5.1. Обгрунтування методу
5.2. Статистичні розрахунки
5.3. Практичні аспекти сегрегаційній аналізу
6. Інші застосування методу геномних відбитків
6.1. Визначення структури родоводу
6.2. Порівняння в межах одного організму
Література

Глава 8. Картування складно успадкованих ознак людини
1. Введення
2. Основи аналізу зчеплення
3. Карта генетичного зчеплення геному людини
4. Планування аналізу зчеплення для хвороб з простим типом успадкування
5. Ускладнення: неповна пенетрантність і помилки клінічної діагностики
6. Ускладнення: генетична гетерогенність і фенокопіі
7. Ускладнення: генетичні взаємодії
8. Полигенное успадкування
9. Картування рідкісних рецесивних ознак
10. Висновок
Література

Предметний покажчик
Покажчик латинських назв
Опис:файлу
Файл: 11644_analiz-genoma-metody.zip
Розмір файлу: 3.29 мб
Посилання для скачування.
Натисніть на кнопку будь-якої соціальної мережі в якій ви активні. Через кілька секунд відкриються посилання для скачування.
{LikeAndRead}
Завантажити фаил з letitbit.net
Завантажити фаил з depositfiles.com
{/LikeAndRead}